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腾讯登录如何降低等温检测假阳性？——解锁解旋酶的魔力
| 导读 | 迈迪安研发的无甘油热稳定DNA解旋酶 (MDX242)，正是为应对这些挑战而生,它打破了传统技术的束缚，为等温扩增技术等领域带来了新的机遇。 |
随着分子诊断技术的飞速发展，对DNA扩增与处理的精度和效率要求日益提高。传统的DNA扩增技术如PCR，虽有效但存在一些局限性，如需要复杂的热循环设备、易产生非特异性扩增等。
迈迪安研发的无甘油热稳定DNA解旋酶 (MDX242)，正是为应对这些挑战而生,它打破了传统技术的束缚，为等温扩增技术等领域带来了新的机遇。它使得DNA扩增过程更加简便、高效，且能显著降低假阳性结果的出现概率，这对于临床诊断、食品安全检测、环境监测等众多领域来说，无疑是一次具有深远意义的技术革新。
迈迪安推出的无甘油热稳定DNA解旋酶是一种多结构域的DNA解旋酶，能够在不需要悬垂结构的情况下解开双链DNA。
无甘油热稳定DNA解旋酶是从携带了来自嗜热细菌Thermoanaerobacter tengcongensis的UvrD基因的大肠杆菌中分离出来的。这种基因产生的热稳定性解旋酶，能够利用ATP水解的能量在不需要特定单链结构的情况下解开双链DNA。
无甘油热稳定DNA解旋酶的核心工作原理是利用ATP水解所释放的能量，驱动解旋酶在DNA双螺旋结构上移动，从而将双链DNA解开。
与依赖热变性的传统方法不同，这种方式无需反复升高和降低温度，大大简化了操作流程，降低了对仪器设备的要求。
更关键的是，这种解旋过程具有高度的选择性和可控性。解旋酶能够特异性地识别并结合到目标DNA序列上，在特定的序列位置启动解旋，这就如同一把精确的 “分子剪刀”，能够精准地将目标DNA区域 “解开”，为后续的检测或分析提供纯净、特异的单链DNA模板。
这种基于生物酶的精准作用机制，避免了传统热变性方法中因高温导致的DNA损伤、非特异性变性等问题，提高了整个检测流程的准确性和稳定性。
01 核心特点
1. 解开双链DNA：通过控制和序列依赖的方式解链双链DNA，在60-65°C的温度范围内解开DNA，而不需要热循环过程，因此可以在无热循环的情况下生成单链模板。
2. 耐热度高：最高可耐受至65°C。80°C加热5分钟可使酶失活。
3. 减少非特异性扩增：减少等温扩增反应中的假阳性，提高检测的可靠性和灵敏度。
02 主要应用
热稳定DNA解旋酶能够在高温下持续保持活性和特异性，这使其在诊断应用中至关重要，能够实现高效、精确且稳定的DNA扩增与处理。它们尤其适用于各种等温扩增技术，如热亲和解旋酶依赖扩增（tHDA）、环介导等温扩增（LAMP）、重组酶聚合酶扩增（RPA）、滚环扩增（RCA）和链置换扩增（SDA），确保扩增过程的高效性与准确性。
除了这些应用，热稳定DNA解旋酶在下一代测序（NGS）文库制备、单核苷酸多态性（SNP）检测和突变分析中的应用也日益广泛。
此外，当与CRISPR技术结合时，能够提高DNA的亲和力，促进Cas酶的结合，从而提升基因编辑或分析的效果。
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FQA 热 门 问 题
Q 1. 解旋酶需要特定的DNA结构才能解旋吗？
A: 解旋酶不要求特定的DNA结构就能够进行解旋。它可以作用于多种双链DNA底物，包括标准的双链DNA以及具有3′或5′端单链DNA突出的双链结构。这种多功能性使得它能够有效地处理各种DNA结构，因此在分子生物学的多种应用中都具有广泛的适用性。
Q 2. 解旋酶在LAMP反应中减少非特异扩增的原理是什么？
A: DNA解旋酶可以直接添加到LAMP反应中，通过序列依赖性地解开双链DNA ，有效减少非特异性扩增的发生，具体原理如下：
选择性可控性解链：解旋酶仅解开目标区域的双链DNA，生成单链DNA模板，而不会暴露非目标区域，从而减少引物与无关序列的随机结合,避免非特异性扩增。
避免热变性引起的非特异性扩增：传统的热变性方法会使所有双链DNA区域熔解，增加引物与非目标序列结合的风险。而解旋酶通过选择性解链，在不需要过高温度的条件下维持引物的特异性。
因此，解旋酶特别适用于对特异性要求较高的扩增方法，如LAMP、tHDA等环介导等温扩增技术，有效减少背景信号干扰，提升检测结果的准确性。
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美国迈迪安生物科技是一家大规模生产各种抗体，各种病毒抗原，各种重组蛋白质，各类 PCR 多聚酶，各种核苷酸和体外诊断关键试剂的大型领军企业。45年以来，迈迪安生命科学公司始终坚持以提供创新的生命科学解决方案和建立值得信赖的合作伙伴关系为我们的宗旨。我们的重点是为体外诊断试剂公司提供优质的原料和服务，使其有助于推动这些领域的发展。
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