基因是否表达，做个cfDNA全基因组测序就可揭晓

  基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中的遗传信息经过转录和翻译，最后转变成具有生物活性的蛋白质分子的过程。检测基因表达水平，就是定性或定量地检测该基因表达产物，最常用的方法有半定量RT-PCR、荧光定量PCR、Northern blotting等。如今，科学家发现，通过cfDNA的全基因组测序可推测基因是否表达。

  奥地利的研究人员通过cfDNA的读长深度模式（read depth patterns）开发出了检测基因表达的方法。该方法建立在上百个健康个体血液样本的数据基础之上，并应用到了上百个癌症转移患者的样本中。

  本文资深作者，奥地利格拉茨医科大学人类遗传学研究员Michael Speicher写到，“我们利用全基因组测序数据来判断基因的表达情况，为理解释放cfDNA的细胞提供了新见解，因此也扩展了现有的cfDNA分析方法。”

  研究小组指出，漂浮在血液中的大部分cfDNA包含了凋亡细胞的遗传物质，例如核小体中仍与蛋白质复合物相配对的DNA。因此，研究小组推断或许能通过cfDNA的读长深度来揭示与基因转录活性相关的核小体踪迹。

  研究人员特别指出，微球菌核酸酶（MNase）试验揭示基因中转录起始位点上游，无核小体DNA也可被转录。基于此，他们首先探讨能否在cfDNA中检测到未被核小体占据的启动子区域，如果可能，那么这些标记是否能反映基因表达谱。对此，研究小组扩大了分析范围，以寻找癌症患者血液中能揭示癌症驱动基因的表达谱。

  从来自50名健康男性和54名健康女性的179份血液样本中，研究人员利用Illumina的Miseq和Nextseq平台进行末端配对测序，以识别血浆中与核小体相关的细胞核DNA，生成的单端测序数据可用来评估转录起始位点附近的读长深度模式，同时他们还参考现有的MNase图以及ENCODE和FANTOM5项目的基因表达数据。这些信息反过来可用于开发基于cfDNA读长深度的预测基因表达的算法。

  通过对两个乳腺癌患者的血循环游离DNA进行全基因组测序，研究人员获得了基因表达谱和拷贝数目，所获数据与原发肿瘤样本的RNA测序数据相一致。随后，研究人员利用同样的方法研究了其他癌症患者426份血液样本的基因表达和拷贝数图谱，患者种类包括转移性结直肠癌、乳腺癌、肺癌或前列腺癌。